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　　Primer Premier Win10是一款非常專業的引物設計軟件，該軟件支持引物設計、限制性內切酶位點分析和DNA基元(motif)查找等功能，真正做到快速化和自動化操作流程，帶來無與倫比的設計體驗，并且該版本為破解版，內置破解補丁，免激活碼即可永久免費進行使用。

【功能特色】

　　1、主要界面可分為序列編輯窗口（Genetank），引物設計窗口（Primer Design），酶切分析窗口（Restriction Sites）和紋基分析窗口（Motif）四大塊

　　2、該軟件就是用來進行引物設計的

　　3、可以簡單地通過手動拖動鼠標以擴增出相應片段所需的引物

　　4、在手動的任何時候，下面顯示各種參數的改變和可能的二聚體、異 二聚體、發夾結構等。也可以給定條件，讓軟件自動搜索引物，并將引物分析結果顯示出來

　　5、進行這些操作非常簡單

【破解教程】

　　1、下載軟件壓縮包文件，點擊“PP624Installer.exe”根據提示完成原版安裝即可

　　2、關閉軟件，將crack文件夾下的patcher.jar文件復制到Premier 6安裝根目錄下…\http\Dwww.premierbiosoft.com\P80\DMIUpdater\DMPP\DM624文件夾中。

　　默認目錄為：C:\Program Files\Primer Premier 6.24

　　3、在開始菜單—運行中輸入CMD，打開命題提示符窗口

　　4、用CD命令定位至目錄：

　　cd C:\Program Files\Primer Premier 6.24\http\Dwww.premierbiosoft.com\P80\DMIUpdater\DMPP\DM624

　　7、然后在光標后輸入：java -jar patcher.jar ，回車即可破解成功

【使用技巧】

　　一、限制性酶切點分析及基元查找功能

　　1.其主要功能在主界面上一目了然。限制性酶切點分析及基元查找功能比較簡單，點擊該功能按鈕后，選擇相應的限制性內切酶或基元（如-10 序列，-35 序列等），按確定即可

　　2.常見的限制性內切酶和基元一般都可以找到,你還可以編輯或者添加新限制性內切酶或基元

　　二、引物設計

　　1.打開DNA序列后點擊按鈕primer，出現“search criteria”窗口，有多種參數可以調整

　　2.搜索目的（Seach For）有三種選項，PCR 引物（PCR Primers）、測序引物（Sequencing Primers）和雜交探針（Hybridization Probes）

　　3.搜索類型(Search Type)可選擇分別或同時查找上、下游引物（Sense/Anti-sense Primer，或Both），或者成對查找（Pairs），或者分別以適合上、下游引物為主（Compatible with Sense/Anti-sense Primer）。另外還可改變選擇區域（Search Ranges），引物長度（Primer Length），選擇方式（Search Mode），參數選擇（Search Parameters）等等

　　3.使用者可根據自己的需要設定各項參數。如果沒有特殊要求，建議使用默認設置。然后按search，隨之出現的Search Progress 窗口中顯示Search Completed 時，再按OK，這時搜索結果以表格的形式出現，有三種顯示方式，上游引物（Sense），下游引物(Anti-sense)，成對顯示(Pairs)。默認顯示為成對方式，并按優劣次序（Rating）排列，滿分為100，即各指標基本都能達標

　　三、引物點擊

　　1.點擊其中一對引物，如第1#引物，并把上述窗口挪開或退出，顯示“Peimer Premier”主窗口，所得結果分三部分，

　　2.模板及產物位置，中間是所選的上下游引物的一些性質，最下面是四種重要指標的分析，包括發夾結構（Hairpin），二聚體（Dimer），錯誤引發情況（False Priming），及上下游引物之間二聚體形成情況（Cross Dimer）

　　3.當所分析的引物有這四種結構的形成可能時，按鈕由變成，點擊該按鈕，在左下角的窗口中就會出現該結構的形成情況

　　4.一對理想的引物應當不存在任何一種上述結構，因此最好的情況是最下面的分析欄沒有，只有。值得注意的是中間一欄的末尾給出該引物的最佳退火溫度

　　四、引物修飾編輯

　　1.在需要對引物進行修飾編輯時，如在5’端加入酶切位點，可點擊，然后修改引物序列

　　2.若要回到搜索結果中，則點擊按鈕。如果要設計簡并引物，只需根據源氨基酸序列的物種來源選擇前述的八種遺傳密碼規則，反推至DNA 序列即可3.對簡并引物的分析不需像一般引物那樣嚴格

　　4.總之，“Premier”有優秀的引物自動搜索功能，同時可進行部分指標的分析，而且容易使用，是一個相當不錯的軟件